二氧化碳培養(yǎng)箱是通過在培養(yǎng)箱箱體內模擬形成一個類似細胞/組織在生物體內的生長環(huán)境,如穩(wěn)定的溫度(37°C)、穩(wěn)定的CO2水平(5%)、恒定的酸堿度(pH值:7.2-7.4)、較高的相對飽和濕度(95%),來對細胞/組織進行體外培養(yǎng)的一種裝置。廣泛應用于細胞、組織培養(yǎng)和某些特殊微生物的培養(yǎng),常見于細胞動力學研究、哺乳動物細胞分泌物的收集、各種物理、化學因素的致癌或毒理效應、抗原的研究和生產、培養(yǎng)雜交瘤細胞生產抗體、體外授精(IVF)、干細胞、組織工程、藥物篩選等研究領域。
用戶對二氧化碳培養(yǎng)箱都有兩條最基本的要求,一是要求二氧化碳培養(yǎng)箱能夠對溫度、二氧化碳濃度和濕度提供最精確穩(wěn)定的控制,以便于其研究工作的進展;二是要求二氧化碳培養(yǎng)箱能夠對培養(yǎng)箱內的微生物污染進行有效的防范,并且能夠定期消除污染,以保護研究成果,防止樣品損失。
一、加熱方式
氣套式加熱和水套式加熱,兩種加熱系統都是精確和可靠的,同時它們都有著各自的優(yōu)點和缺點。水套式加熱是通過一個獨立的水套層包圍內部的箱體來維持溫度恒定的,其優(yōu)點:水是一種很好的絕熱物質,當遇到斷電的時候,水套式系統就可以比較長時間的保持培養(yǎng)箱內的溫度準確性和穩(wěn)定性,有利于實驗環(huán)境不太穩(wěn)定(如有用電限制或經常停電)的用戶選用。氣套式加熱是通過遍布箱體氣套層內的加熱器直接對內箱體進行加熱的,又叫六面直接加熱。氣套式與水套式相比,具有加熱快,溫度的恢復比水套式培養(yǎng)箱迅速的特點,特別有利于短期培養(yǎng)以及需要箱門頻繁開關取放樣的培養(yǎng)。此外,對于使用者來說氣套式設計比水套式更簡單化(水套式需要對水箱進行加水、清空和清洗,并要經常監(jiān)控水箱運作的情況,還有潛在的污染隱患)。
二、微處理控制系統
微處理控制系統是維持培養(yǎng)箱內溫度、濕度和CO2濃度穩(wěn)態(tài)的操作系統。微處理控制系統和其它各種功能附件(如高低溫自動調節(jié)和警報裝置、CO2警報裝置、密碼保護設置等)的運用,使得二氧化碳培養(yǎng)箱的操作和控制都非常的簡便。如:LEEC的PID微處理器觸摸屏控制系統,它能嚴格控制氣體的濃度并將其損耗降至極低水平,以保證培養(yǎng)環(huán)境恒定不變,且能保證長期培養(yǎng)過程中箱內溫度精確,并有液晶顯示,圖形化過程監(jiān)控、干預事件記錄等。此外報警系統也是不可少,它能讓你及時知道培養(yǎng)箱出現的情況,并做出反應,從而最大限度地降低了損失,保證實驗的連續(xù)性。有些培養(yǎng)箱有聲/光報警裝置,溫度變化達±0.5℃,或CO2濃度變化達±5%時,即會自動報警;有些具有CO2濃度異常報警顯示功能;有些具有低壓、斷電報警功能。這些裝置都是為了方便使用者,以減少繁瑣枯燥的實驗過程而設計的。
三、污染物的控制
污染是導致細胞培養(yǎng)失敗的一個主要因素,江蘇天翎儀器有限公司設計了多種不同的裝置去減少和防止污染的發(fā)生,其主要途徑都是盡量減少微生物可以生長的區(qū)域和表面,并結合自動排除污染裝置來有效防止污染的產生。例如,鑒于CO2培養(yǎng)箱在使用過程中有時會伴有霉菌生長,為確保培養(yǎng)箱免受污染且保證儀器箱體內的生物清潔性,有些公司開發(fā)設計了帶有紫外消毒功能的CO2培養(yǎng)箱;還有公司設計HEPA高效濾器能過濾培養(yǎng)箱內空氣,可過濾除去99.97%的0.3um以上的顆粒;此外,自動高溫熱空氣殺菌裝置能使箱內溫度達到高溫(如200℃)從而殺死所有污染微生物,甚至芽孢等耐高溫微生物,這些裝置對于細胞培養(yǎng)來說是更有安全保障的。
四、二氧化碳濃度控制可選二氧化碳變送器型號:K33-ICB-20%
紅外傳感器(IR)或熱導傳感器(TC)進行測量。兩種傳感器各有優(yōu)缺點。熱導傳感器監(jiān)控CO2濃度的工作原理是基于對內腔空氣熱導率的連續(xù)測量,輸入CO2氣體的低熱導率會使腔內空氣的熱導率發(fā)生變化,這樣就會產生一個與CO2濃度直接成正比的電信號。TC控制系統的一個缺點就是箱內溫度和相對濕度的改變會影響傳感器的精確度。當箱門被頻繁打開時,不僅CO2濃度,溫度和相對濕度也會發(fā)生很大的波動,因而影響了TC傳感器的精度。當需要精確的培養(yǎng)條件和頻繁開啟培養(yǎng)箱門時,此控制系統就顯得不太適用了。紅外傳感器(IR)它是通過一個光學傳感器來檢測CO2水平的。IR系統包括一個紅外發(fā)射器和一個傳感器,當箱體內的CO2吸收了發(fā)射器發(fā)射的部分紅外線之后,傳感器就可以檢測出紅外線的減少量,而被吸收紅外線的量正好對應于箱體內CO2的水平,從而可以得出箱體內CO2的濃度。由于IR系統是通過紅外線減少來確定箱內CO2濃度,而箱體內顆粒物能夠反射或部分吸收紅外線,使得IR系統對箱體內顆粒物的多少比較敏感,IR傳感器應用在進氣口具有HEPA高效空氣過濾器的培養(yǎng)箱較合適。
五、相對濕度可選溫濕度變送器H2系列
箱內濕度對于培養(yǎng)工作來說是一項非常重要然而又經常被忽略的因素。維持足夠的濕度水平并且要有足夠快的濕度恢復速度(如在開關門后)才能保證不會由于過度干燥而導致培養(yǎng)失敗。目前大多數的二氧化碳培養(yǎng)箱是通過增濕盤的蒸發(fā)作用產生濕氣的(其產生的相對濕度水平可達95%左右,但開門后濕度恢復速度很慢)。盡量選擇濕度蒸發(fā)面積大的培養(yǎng)箱,因為濕度蒸發(fā)面積越大,越容易達到最大相對飽和濕度并且開關門后的濕度恢復的時間越短。